Análisis molecular y filogenético del genotipo F de Chlamydia trachomatis aislados en México en 2011 / Molecular and phylogenetic analysis of the F genotype of Chlamydia trachomatis isolated in Mexico in 2011

Resumen Antecedentes: Chlamydia trachomatis es la bacteria que se detecta con mayor frecuencia en las infecciones de transmisión sexual. Se han identificado 20 genotipos de C. trachomatis mediante el gen ompA y varias genovariantes mediante el análisis de polimorfismo de un solo nucleótido (SNP). En México, el genotipo F es el más frecuente. Objetivo: Identificar la existencia de subtipos del genotipo F. Método: Se analizaron siete cepas del genotipo F de C. trachomatis aisladas en 2011, mediante secuenciación de nucleótidos y mapeo con enzimas de restricción. Resultados: El análisis de SNP mostró dos cepas con el mismo SNP en el nucleótido 288 (C288T), mientras que con enzimas de restricción se identificó una variante con diferente RFLP (polimorfismo de la longitud de fragmentos de restricción) cuando se tratan con la mezcla de enzimas HinfI y TaqI. Conclusión: En México se encuentran dos subtipos del genotipo F y solo las enzimas de restricción HinfI y TaqI pueden identificar la existencia de uno de estos genotipos F.

Abstract Background: Chlamydia trachomatis is the most frequently identified bacterium in sexually transmitted infections. Twenty C. trachomatis genotypes have been determined using the ompA gene and several genovariants by single nucleotide polymorphism (SNP) analysis. In Mexico, the F genotype is the most frequent. Objective: To identify subtypes of the F genotype. Method: Seven C. trachomatis genotype F strains isolated in 2011 were analyzed by nucleotide sequencing and restriction enzyme mapping. Results: SNP analysis showed two strains with the same SNP at nucleotide 288 (C288T), while with res-triction enzymes, a variant with different RFLP (restriction fragment length polymorphism) was identified when treated with the mixture of HinfI and TaqI enzymes. Conclusion: In Mexico, there are two subtypes of F, and only with restriction enzymes HinfI and TaqI can identify one of the genovariants of the F genotype.

Identification of Chlamydia trachomatis genotypes in Mexican men with infertile women as sexual partners / Identificación de genotipos de Chlamydia trachomatis en hombres mexicanos con mujeres infértiles como parejas sexuales

Background: Chlamydia trachomatis is considered a public health problem due to the high prevalence in sexually active women and men. The distribution of genital Chlamydia genotypes among Mexican men is unknown. Objective: To assess the prevalence of Chlamydia genotypes in men with infertile women as sexual partners. Methods: A total of 659 urine samples were collected from men whose sexual partners were infertile women; the identifying Chlamydia infection was by means of a real-time nucleic acid amplification test (qPCR). OmpA gene PCR-RFLP and sequencing were used to confirm the genotypes of C. trachomatis. The association of genotypes with age, spermatic parameters and gynecological data of sexual partners was further analyzed. Results: Forty-nine urine samples were positive infection (7.4%). The Chlamydia infection was significantly associated with teratozoospermia, azoospermia, hypospermia, and oligozoospermia. Five genotypes (F 51%; 12.2% to D; 12.2% to E; 6.1% to L2 and 4.1% Ia) were correctly identified. None genotypes identified in this comparative study were positively associated with changes in some of the spermatic values because all of them typically produce some considerable damage to these cells. Conclusions: The F genotype was the most frequent genotype identified in infertile men from Mexico City and all genotypes play an important role in the seminal alteration of Mexican men whose female partners are infertile.(AU)

Antecedentes: Chlamydia trachomatis se considera un problema de salud pública debido a la alta prevalencia en mujeres y hombres sexualmente activos. Se desconoce la distribución de los genotipos genitales de Chlamydia entre los hombres mexicanos.Objetivo: Evaluar la prevalencia de los genotipos de Chlamydia en hombres con mujeres infértiles como parejas sexuales. Métodos: Se recogieron 659 muestras de orina de hombres cuyas parejas sexuales eran mujeres infértiles; la identificación de la infección por Chlamydia se realizó mediante una prueba de amplificación de ácido nucleico en tiempo real (qPCR). Se utilizaron la PCR-RFLP y la secuenciación del gen OmpA para confirmar los genotipos de C. trachomatis. Se analizó en mayor profundidad la asociación de los genotipos con la edad, los parámetros espermáticos y los datos ginecológicos de las parejas sexuales. Resultados: Cuarenta y nueve muestras de orina dieron positivo para la infección (7,4 %). La infección por Chlamydia se asoció significativamente con la teratozoospermia, la azoospermia, la hipospermia y la oligozoospermia. Se identificaron correctamente cinco genotipos (F 51 %; 12,2 % para D; 12,2 % para E; 6,1 % para L2 y 4,1 % Ia). Ninguno de los genotipos identificados en este estudio comparativo se asoció positivamente con cambios en algunos de los valores espermáticos porque todos ellos suelen producir algún daño considerable en estas células. Conclusiones: El genotipo F fue el más frecuente identificado en hombres infértiles de Ciudad de México y todos los genotipos desempeñan un papel importante en la alteración seminal de los hombres mexicanos cuyas parejas femeninas son infértiles.(AU)

Detección atípica de Chlamydia pneumoniae no humana en una muestra endocervical. Reporte de caso / Atypical detection of non-human Chlamydia pneumoniae in an endocervical sample. Case Report

Resumen ANTECEDENTES: Chlamydia trachomatis es uno de los principales microorganismos de trasmisión sexual asociado de manera importante con infertilidad femenina. La detección de genotipos y nuevas variantes de Chlamydia trachomatis permite conocer su prevalencia, distribución geográfica, identificar la aparición de resistencia antimicrobiana y las asociaciones clínicas o comportamientos sexuales y desarrollar vacunas. Este caso clínico es el primer informe de infección endocervical por una cepa diferente a C trachomatis. CASO CLÍNICO: Paciente de 25 años, con diagnóstico de infertilidad primaria de 2 años de evolución por factor endocrino-ovárico (sobrepeso e hipotiroidismo subclínico) y por factor masculino de hipospermia y teratozoospermia. El cultivo microbiológico endocervical detectó la infección por Ureaplasma spp y Chlamydia spp. La identificación de la cepa de Chlamydia mediante secuenciación del gen 16S del ARNr informó que era Chlamydia pneumoniae. La existencia de un plásmido en esta cepa de C pneumoniae confirmó que la infección endocervical fue por una cepa de Chlamydia pneumoniae no humana. CONCLUSIÓN: Este caso clínico sugiere la posibilidad de que una cepa de C pneumoniae no humana sea capaz de trasmitirse sexualmente a los humanos, estar circulando en la población mexicana y causar infertilidad, aunque aún se desconocen el origen y la dirección de la trasmisión.

Abstract BACKGROUND: Chlamydia trachomatis is one of the leading sexually transmitted microorganisms that is significantly associated with the development of female infertility. The detection of genotypes and new variants ofChlamydia trachomatisallows us to know their prevalence and geographic distribution, identify the appearance of antimicrobial resistance, clinical associations, or sexual behaviors, and develop vaccines. This clinical case reports for the first time endocervical infection by a strain other thanC. trachomatis. CLINICAL CASE: A 25-year-old woman with primary infertility of 2 years of evolution due to endocrine-ovarian factor (overweight and subclinical hypothyroidism) and male factor characterized by hypospermia and teratozoospermia. Endocervical microbiological culture detected infection byUreaplasma urealyticumandChlamydiaspp. Identification of theChlamydiastrain by sequencing the 16S rRNA gene reported that it wasChlamydia pneumoniae. The presence of plasmid in this strain ofC. pneumoniaeconfirmed that the endocervical infection was by a non-humanChlamydia pneumoniaestrain. CONCLUSION: This clinical case suggests that a non-human strain ofC. pneumoniaecan be sexually transmitted to humans, circulating in the Mexican population, and causing infertility, although the origin and direction of transmission are still unknown.

Obtaining an ELISA test based on a recombinant protein of Chlamydia trachomatis

Chlamydia trachomatis is considered as a public health problem due to its high prevalence and increased rates of gynecological disorders. The major outer membrane protein (MOMP) of this bacterium is the most abundant protein in its membrane and has been evaluated not only as a vaccine development candidate but also is used in many diagnostic tests. The MOMP weighs 69 kDa and contains four variable segments (VS 1-4) separated by constant regions. Several research groups have developed recombinant single-variable segments of MOMP expressed in Escherichia coli cytoplasm. But, all variable segments have been used minimally for the diagnosis of a chlamydial infection. In this experiment, the authors obtained the recombinant MOMP of C. trachomatis (rMOMP) in E. coli rMOMP and extracted, purified, and partially characterized it. This was later used to identify anti-Chlamydia trachomatis antibodies in sera of infertile patients by immunodetection assays, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and indirect immunofluorescence tests. The ELISA test showed high sensitivity and low specificity of 100 and 58.3%, respectively. The above results obtained were linked to the cross-reactivity of antibodies against C. pneumoniae or C. psittaci. Hence, an evaluation was performed to obtain an optimized test for the diagnosis of C. trachomatis infection

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